革蘭氏染色法是丹麥醫(yī)生Christain Gram于1884年所發(fā)明，是細菌學中廣泛使用的一種鑒別染色法，亦是一種復染法，通過此法染色可將細菌鑒別為革蘭陽性菌(G⁺)和革蘭陰性菌(G^-)兩大類。細菌的不同顯色反應是由于細胞壁對乙醇的通透性和抗脫色能力的差異，主要是肽聚糖層厚度和結(jié)構(gòu)決定的，在同樣染色環(huán)境中利用細菌不同的等電點(Gram陽性細菌等電點為pH2.0~3.0，Gram陰性細菌等電點為pH4.0~5.0)，陽性細菌帶的負電荷比陰性細菌帶的負電荷多，與帶正電荷的堿性染料如結(jié)晶紫結(jié)合較牢，再加入媒染劑(碘)進入菌體后，與染料結(jié)合形成不溶于水的結(jié)晶紫-碘-蛋白復合物，并與陽性菌菌體內(nèi)的核糖核酸鎂鹽結(jié)合，使已著色的細菌不易脫色；而分化劑(苯胺、丙酮等)不易透過陽性菌的細胞壁，故陽性菌不易退色；但分化劑容易進入陰性菌菌體內(nèi)，溶解染料和碘復合物，使陰性菌脫色。

    Leagene 改良Gram-Weigert(苯胺結(jié)晶紫法)是在經(jīng)典的革蘭染色配方進行改進，使用蘇木素和Weigert碘液加強染色，該法也是在草酸銨結(jié)晶紫法演化過來的；臨床標本直接涂片，背景干凈，胞內(nèi)吞噬體清晰易辨認，細菌染色特征典型，可以區(qū)分Gram陽性細菌和陰性細菌，尤其適用于鑒別細菌和非細菌的藍色微顆粒狀物質(zhì)(如鈣鹽)。該試劑僅用于科研領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途。